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Comment calculer la concentration à l'aide d'absorbance

Comment calculer la concentration à l'aide d'absorbance


De nombreux composés absorbent la lumière dans la partie visible ou ultraviolette du spectre électromagnétique. Loi de Beer régit la quantité de rayonnement absorbée et indique que l'absorbance est directement proportionnelle à la concentration. Ainsi, comme la concentration d'un composé dissous dans un solvant donné augmente, l'absorbance de la solution devrait également augmenter proportionnellement. Chimistes tirer parti de cette relation pour déterminer la concentration des solutions inconnues. Cela nécessite tout d'abord des données d'absorbance sur une série de solutions de concentration connue appelée solutions « standards ». Les données de l'absorbance et la concentration sont ensuite tracées dans une « courbe d'étalonnage » d'établir leur relation mathématique. La concentration de l'échantillon inconnu peut être déterminée en mesurant l'absorbance.

Instructions

• Construire un terrain de calibrage d'absorbance sur l'axe des ordonnées et la concentration sur l'axe des x pour les solutions étalons. Les points de données doivent se situer le long de la ligne droite raisonnablement. Deux points de données représentent le minimum absolu, et plus c'est mieux.

• Tracer une ligne droite "ajustée" à travers les points de données et de prolonger la ligne au point d'intersection de l'axe des ordonnées. Choisir deux points aléatoires, pas les points de données, sur la ligne et de déterminer leur x et y coordonnées. Étiqueter ces coordonnées comme (x 1, y1) et (x 2, y2).

• Calculer la pente, m, de la ligne suivant la formule m = (y1 - y2) / (x 1 - x 2). Déterminer l'ordonnée à l'origine, b abrégée, en notant la valeur y auquel la droite croise l'axe des ordonnées. Par exemple, pour deux au hasard points à coordonnées (0,050, 0.105) et 0,525 (0,315) sur la ligne de la pente est donnée par m = (0,105 - 0,315) / (0,050 - 0,525) = 0,440. Et si la ligne traverse l'axe des ordonnées à 0,08, alors cette valeur représente l'ordonnée à l'origine.

• Écrire la formule de la ligne de la courbe d'étalonnage dans la forme y = mx + b. en reprenant l'exemple de l'étape 3, l'équation est y = x 0.440 + 0,080. Il s'agit de l'équation de la courbe d'étalonnage.

• Substituer l'absorbance de la solution de concentration inconnue dans l'équation déterminée à l'étape 4 en tant qu'y et résoudre pour x, où x représente concentration. Si, par exemple, une solution inconnue présentait une absorbance de 0,330, à l'aide de l'équation déterminée à l'étape 4 donnerait: x = (y - 0,080) / 0.440 = (0,330 - 0,080) / 0.440 = 0,568 moles par litre.