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Comment faire pour identifier les bactéries à l'aide de la coloration de Gram

Comment faire pour identifier les bactéries à l'aide de la coloration de Gram


La coloration de Gram est une différence de coloration méthode utilisée dans le cadre de laboratoire de microbiologie clinique pour identifier les bactéries qui possède une membrane cellulaire externe épaisse ou une fine membrane cellulaire externe. Les solutions chimiques utilisées dans la Gram coloration méthode vous permettra d'identifier si une bactérie est Gram positif (membrane cellulaire épaisse) ou Gram négatif (fine membrane cellulaire). Sachant que bactérie est Gram positif ou Gram négatif vous permettra de déterminer l'espèce de la bactérie, caractéristiques de la maladie les causes de la bactérie et les antibiotiques nécessaires pour tuer les bactéries.

Instructions

• Chaleur-fixer les bactéries sur une lame de verre. Transférer les bactéries auprès d'un échantillon de spécimens prélevés à l'aide d'un écouvillon stérile ou inoculant boucle. Transmettre la bactérie sur une lame de verre préalablement nettoyé. Faire chauffer la lame au-dessus d'une flamme de bec Bunsen pendant quelques secondes fixer les bactéries à la diapositive. Placez la lame sur une grille au-dessus d'un évier.

• Versez 5 à 10 gouttes de solution de violet de gentiane à la lame de verre et attendez environ une minute. Cela tachera la violette de bactéries.

• Rincer la lame à l'aide d'eau distillée. Versez 5 à 10 gouttes de solution d'iode de Gram sur la diapositive et attendez une minute. Solution d'iode de la Gram apposera la tache violette en cristal pour les bactéries si la bactérie a une membrane cellulaire épaisse.

• Rincer la solution d'iode de la Gram désactivées à l'aide d'eau distillée. Versez 5 à 10 gouttes d'acétone et attendez environ 10 secondes. L'acétone va enlever tache violette en cristal de bactéries avec des parois cellulaires minces mais n'enlèvera pas la solution de violet de gentiane de bactéries avec des parois cellulaires épaisses.

• Versez 5 à 10 gouttes de solution de safranine contre-colorant sur la lame de verre et attendez une minute. La safranine tachera la paroi cellulaire des bactéries rouge si la tache violette en cristal a été supprimée à l'aide de l'acétone.

• Rincer la solution safranine à l'aide d'eau distillée. Une bactérie de cellule-à parois minces conservera la solution de safranine. Une bactérie parois cellulaires conservera encore la tache violette en cristal, donc la solution de safranine va être rincée.

• Placez la lame au microscope sous immersion dans l'huile et d'observer les bactéries. Bactéries à Gram positif apparaîtront violet alors que les bactéries à Gram négatif apparaîtront en rouges.