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Tests pour les bactéries Gram négatif



Bactéries Gram-négatives donnent un résultat négatif sur le Gram coloration test parce qu'elles ont un intérieur et une membrane externe avec une fine couche de peptidoglyans entre les deux. Lorsque microbiologistes ont déterminé qu'un isolat est Gram négatif, il peut travailler divers autres tests biochimiques pour limiter l'éventail des possibilités et d'identifier le genre.

Fermentation des hydrates de carbone

Dans ce test, les bactéries sont cultivées dans un bouillon contenant le rouge de phénol indicateur de pH, avec un plus petit tube inséré à l'envers dans le tube à essai. Quatre tubes sont généralement utilisé--un avec bouillon glucosé, l'autre avec du lactose, un tiers avec le saccharose et un quatrième avec mannitol. Lorsque les bactéries fermente les sucres, il produit les sous-produits acides qui diminuent le pH de la solution, provoquant l'indicateur rouge de phénol à jaunir. Certaines bactéries peuvent également créer des produits alcalins, bien que le test de fermentation des hydrates de carbone n'est pas conçu pour détecter ces. Les bactéries peuvent être classées selon les types de sucres qu'ils fermentent et si ils produisent de l'acide et de gaz ou de l'acide seul.

Test SIM

Le test SIM intègre trois épreuves distinctes dans une procédure unique et pratique. Les bactéries sont introduites dans la gélose en poignardant c'avec une boucle de l'inoculation. L'agar contient un mélange d'acides aminés et de deux indicateurs, de nitrate de plomb et de réactif de Kovac. Si les bactéries métabolise les acides aminés contenant du soufre, sulfure d'hydrogène forme et combine avec le nitrate de plomb, tournant l'agar noir. Si les bactéries métabolise l'acide aminé tryptophane, elles forment indole qui réagit avec le réactif de la Kovac, faisant un anneau rouge vif. Enfin, si les bactéries sont capables de se déplacer, ils se propagent vers l'extérieur du point où elles ont été initialement introduits. Si ils ne peuvent pas se déplacer, leur croissance reste concentrée autour de l'endroit où l'agar a été initialement poignardé.

Le citrate et Tests de l'uréase

Le test de citrate utilise gélose citrate de couleur verte, qui contient de l'acide citrique et un indicateur de pH. Si les bactéries possèdent l'enzyme perméase de citrate, ils métaboliser le citrate et produisent des produits alcalins qui causent l'indicateur de pH à changer de couleur au bleu. Le test à l'uréase, en revanche, utilise un bouillon d'urée orange avec un indicateur de rouge de phénol à faibles doses. Certaines bactéries ont une enzyme appelée uréase et peuvent décomposer l'urée en ammoniac et de dioxyde de carbone. L'ammoniac est alcaline et modifie le pH. Si le bouillon devient rouge pourpre, les bactéries sont uréase positive.

Test de phénylalanine désaminase

Ce test utilise gélose contenant de l'acide aminé phénylalanine. Si les bactéries introduites à la gélose possèdent l'enzyme déaminase de phénylalanine, ils se décomposent l'acide aminé en acide phénylpyruvique en supprimant le groupe amino. Les bactéries sont autorisés à cultiver pendant un certain temps, puis le chlorure ferrique est ajouté. La couleur sera soit inchangé, auquel cas les bactéries n'ont pas l'enzyme, ou il devient olive vert, auquel cas les bactéries ont l'enzyme.

Identification

Ces tests peuvent être utilisés pour identifier les bactéries à Gram négatif appartenant à un genre souvent rencontrées. Les salmonelles, par exemple, sont au lactose négative, uréase négative, PA désaminase négative et acide uniquement (pas de gaz) positive pour le glucose et il peut se déplacer (est mobile). E. coli, en revanche, est négatif de sulfure d'hydrogène, acide indole positif et capable de se déplacer, citrate négatif, négatif de glucose, lactose positif. En procédant à ces essais, microbiologistes peuvent comprendre quel genre de bactéries ont été présents dans un échantillon, ce qui est particulièrement important pour le suivi des foyers de maladie.